[﷽]
السلام عليكم👋
#MICROBIOLOGY:-
#GENERAL_BACTERIOLOGY:-
#بوست_رقم_[31]
⏪مواصلة للبوست الفات____🏃♂
✴في البوست الفات سألنا: هل ممكن ندخل جين فيهو صفات مرغوبة داخل ال Human cells؟🤔
⇐ايوا ممكن من خلال حاجة إسمها Gene therapy وفيها بنستبدل جين تالف جوا الخلية بجين آخر ذو صفات وراثية جيدة.
_________
✴طيب قلنا ف أي عملية Recombination محتاجين Vector. السؤال: هل ال Bacteriophage ينفع نستخدمها ك Vector ف ال Human cells؟🤔
● ال Bacteriophage عبارة عن Virus متخصصة ف إنها infect فقط ال Bacterial cells لأنو عندها Receptors معينة لا توجد الا ف ال Bacteria.
● وبالتالي ال Bacteriophage م ح تنفع ك Vector لل Human cells؛ وتبعا ليها يبقى ال Cosmid برضو م ح ينفع ك Vector.
● وأيضا ال Plasmid لا تصلح؛ لأنو م كل ال Human cells بيقبلوا Plasmid.
● وبالتالي ماف أي Vector من الثلاث المذكورين ح ينفع✋.
___________
✴ العلماء عشان يحلوا المشكلة دي؛ قاموا فكروا ف إنهم يستخدموا الفيروسات اللي بتصيب البشر او الحيوانات عموما:
#Animal_virus.
⇐ في إنهم يستخدموها في نقل الجينات.
● عندنا 3 أنواع من الفيروسات المستخدمة لنقل جينات داخل الخلية البشرية وهم:
✪Retroviruses.
✪Adenoviruses.
✪Vaccinia viruses.
● بنجيب الفيروسات دي وبنعمل تعديل لل Genome بتاعها؛ بحيث انو ننزع منها الجينات الممرضة ونضع الجينات المرغوبة.
⇐ يعني كأننا بنستخدم الفيروس كمركبة لنقل الجينات عشان كدة بسموها:
#Gene_delivery_vechile
══●══●══●══●══●══●══
✴طيب عشان يكون عندنا Vector نموزجي لازم تتوفر فيهو الآتي:
ⓐ As little as possible to the overall size of recombinant Molecule:-
☜ يعني ال Vector طوله مفترض يكون أصغر ما أمكن بالنسبة لل Recombinantm ككل عشان يحمل لي اكبر طول ممكن من ال DNA المراد مضاعفته.
______________
ⓑ Well characterized regarding gene location and Nucleotide
sequence:-
☜ لابد من انو يكون معروف التتابع الجيني؛ يعني لازم اعرف ترتيب الجينات عشان لما أجي أقطع حتة؛ انتبه للجينات المهمة؛ مثلا الجين المسؤول عن ال Replication.
______________
ⓒRestriction site:-
☜ لازم يكون عنده موضع أقطعه ع الجين عشان اقطعها بإنزيم ال Endinuclease واخت الجين المطلوب محلها.
_______________
ⓓCabable for autonomous replication:-
☜ لازم يكون قادر ع التضاعف بصورة مستقلة؛ والا الجين المرغوب م ح اقدر أضاعفه.
⇐ الشي التاني لازم يكون عليه Selectable marker عشان اقدر اميزه عن غيره من الجينات الموجودة جوة ال Host.
☜ بعدها بنجيب إنزيم ال Ligase ونلحم بيه ال DNA ع ال Plasmidوادخلهم جوا ال Host cell👌.
[كدة خلصنا ال Vector✋]
══●══●══●══●══●══●══
③ Restriction endonuclease enzyme:-
""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""""
☜ هو عبارة عن إنزيم بيقدر يتعرف على جزيئات معينة داخل ال Nucleutide squensee وبيقدر يقطعها
◆ فمثلا عندنا إنزيم اسمه:
#EcoR1
◆ الانزيم دا بيتعرف على حتة ف ال DNA بالتتابع:
#GAATTC
◆ بيقطعها عشان يحل محلها الجين المطلوب.
══●══●══●══●══●══●══
④ Host organism:-
""""""""""""""""""""""""""""""
☜بعدها بنقوم ندخل ال Recombinant molecule واللي قلنا انو مكون من Plasmid والجين المطلوب مضاعفته(مثلا جين الإنسولين) داخل خلية Host معين مثلا:
➣Fungi
➣Bacreria
◆ ال E.coli هو ال host المناسب لمعظم ال التحارب بتاعت ال:
#Genetic_engeneering
_________
✴ أي Host بنستعمله لازم يتوافر فيه الشروط الآتية:
✸-أولا: الل Host اللي بنستخدمه لازم يكون خالي من انزيم ال Restriction اللي انا استخدمتها ف التجربة؛ طيب ليه؟🤔
☜عشان م يكسر ال Recombinant molecule.
___________
✸-ثانيا: لابد من توفر طريقة معينة يمكن بها فصل الجين المطلوب عن DNA الخلية.
___________
✸-ثالثا: الخلية الHost يجب إنها تكون خالية من ال Sex pilus ليه؟😉
☜ عشان م تنقل الجين المطلوب لكل الخلايا التانية.
══●══●══●══●══●══●══
✴Application of recomcombinant DNA technology:
ال DNA technology إستفدنا منها ف الآتي:
☉-Production of biological products of medical importance:
☜ تحضير منتجات ذات أهمية طبية
مثال الهرمونات كالانسولين.
__________
☉-Production of recombinant vaccines:
☜برضو ممكن ننتج Vaccin لعدد من الميكروبات. مثلا ال Vaccine بتاعت ال Hepatitis B محضرة عن طريق ال
#Genetic_Engineering
___________
☉-Gene probes:-
☜ دي تقنية بنستخدمها في الصعب تشخيصها.
☜ وفيها بنقوم نشيل RNA او ال DNA بتاع الميكروب المعين (افرص Hepatitis) ونحضر منه Complementary strand.
☜ بنلصق علامة مميزة ف ال Complementary وبكون محفوظ ف المعمل. بنستخدمها لما يكون عندنا مريض شاكين انو عندو Hepatitis.
#تابع⬇
>>Click here to continue<<